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大家都知道ELISA試劑盒有很多種檢測方法,每一種檢測方法都有它的優(yōu)勢與劣勢,在今天的分享內(nèi)容中主要介紹直接法和間接法他們在ELISA實驗時的優(yōu)勢與劣勢!
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
1.優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。
2.缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。
二、間接法
此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
1.優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
2.缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高。
被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇,才可防止交互反響或競爭一樣的抗原部位。
1.優(yōu)勢:高活路,高專一性,抗原無須事前純化。
2.缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體部位。
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