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保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道?

更新時間:2015-05-14 點擊量:1439

    進(jìn)口的Abcam抗體大多價格昂貴,如保存不當(dāng)除造成的經(jīng)濟(jì)損失以外還可能會導(dǎo)致實驗的不成功,直接耽誤科研工作的進(jìn)展。那我們應(yīng)該如何保Abcam抗體呢,讓上海恒遠(yuǎn)于您一起來分享一下。

*、保存溫度和條件

    對于很多抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是*保存條件。分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷,以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于4℃。在收到抗體時,在10000×g下離心20秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,并以小等份轉(zhuǎn)移至低蛋白結(jié)合微量離心管中。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應(yīng)不小于10μl;等份越小,儲液濃度因抗體蒸發(fā)及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。

    在大多數(shù)情況下,收到抗體時在4℃下保存一至兩周,然后再冷凍進(jìn)行長期保存是可以接受的,但也許腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而應(yīng)該盡快凍存。同樣,遵照數(shù)據(jù)表上的建議是重要的.

第二、用*防止污染

    為了防止微生物污染,可將*加入抗體制備品中達(dá)到0.02%(w/v)的終濃度。很多abcam抗體已經(jīng)包含這種防腐劑,所用濃度范圍為0.02至0.05%。

第三、避免反復(fù)凍融

    重復(fù)冷凍/融化循環(huán)可使抗體變性,導(dǎo)致其形成使抗體結(jié)合能力降低的聚集物。

    保存于-20℃對于大多數(shù)抗體是適當(dāng)?shù)?;保存?80℃無明顯優(yōu)勢。冰箱不能為無霜型。這些冷凍和融化之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜)恰恰是應(yīng)該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應(yīng)置于具有zui小溫度波動的冰箱區(qū)域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。

    有些研究人員加入冷凍保護(hù)劑甘油達(dá)到50%的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點降低至低于-20℃。雖然這對于很多抗體是可接受的,但是只有一小部分我們提供的抗體測試了在該保存條件下的穩(wěn)定性,并且我們的保證僅使用于按數(shù)據(jù)表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于-80℃,因為該溫度低于甘油的凝固點。請注意甘油可被細(xì)菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護(hù)劑,則應(yīng)當(dāng)小心操作,以得到無菌制備物。

    應(yīng)避免抗體在稀釋至工作濃度后在4℃下保存超過一天。蛋白質(zhì)在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為1mg/ml或更高。這是在抗體溶液中加入蛋白質(zhì)例如BSA作為穩(wěn)定劑的理論基礎(chǔ)。加入的蛋白質(zhì)也有助于減少抗體因結(jié)合于容器壁上而造成的損失。對于打算進(jìn)行偶聯(lián)的抗體而言,由于穩(wěn)定蛋白質(zhì)會與抗體競爭,降低了偶聯(lián)的效率,所以不應(yīng)加入穩(wěn)定蛋白質(zhì)。

    以上幾點保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道?針對以上要求、方法,同樣也適用于其他抗體,希望我們的這些建議對您的實驗也幫助,上海恒遠(yuǎn)祝您實驗成功。