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恒遠介紹:使用動物血清來培養(yǎng)細胞的實驗方法

更新時間:2014-05-15 點擊量:894

    今天就是本月的中旬標記啦,點擊我公司的資訊動態(tài)中回顧一下能夠看到,在這半個月以來,上海恒遠主要給朋友們介紹到了動物血清、中檢所標準品、酶聯(lián)免疫試劑盒,這三種產(chǎn)品也是我公司的主營產(chǎn)品。下面就來看看我們今天的主要內(nèi)容吧,血管平滑肌細胞培養(yǎng)方法之貼塊法,我們就主要來看看貼塊法。
    動物經(jīng)頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開血管,刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層,切成約1mm寬的小條,浸泡在含血清的Hank's液中,并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱,2h左右,取出培養(yǎng)瓶加入20%動物血清的培養(yǎng)液,再放回培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)4天。4天后可見細胞從組織中遷移游出。
不同動物血管結(jié)構(gòu)有差異,豬和猴較易操作,但小動物如兔、鼠因其血管小,血管壁薄等特點,使之難以分離。另外組織塊太薄,不易粘附培養(yǎng)基,也使細胞較難生長。
    那么我們要怎樣去避免培養(yǎng)不成功呢?上海恒遠生物建議您在本次實驗中需要注意:
1、種植組織塊的數(shù)目,如75cm2的長頸瓶組織塊不得少于30 ;
2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的種屬加入適量的不同血清,一般可加入胎牛血清,若小牛血清增殖效果差,應(yīng)加胎牛血清(我公司是專業(yè)代理GIBCO、NQBB胎牛血清的供應(yīng)商,代理,提供全程技術(shù)指導),通常濃度為10%~20%;
3、培養(yǎng)基的選擇:常用的有DMEM,M199培養(yǎng)基。培養(yǎng)兔的平滑肌細胞用DMEM效果較好。
    以上就是使用動物血清來培養(yǎng)細胞的實驗方法了,上海恒遠產(chǎn)品優(yōu)勢:*、完善、穩(wěn)定,提供全程實驗技術(shù)指導。