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這些ELISA試劑盒的實驗操作禁忌,您觸碰到了嗎?

更新時間:2018-01-09 點擊量:1050

  ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。ELISA試劑盒實驗雖然具有檢測時間短,操作非常簡便的優(yōu)點,但是其實驗的結(jié)果的影響因素也是有很多,所以實驗過程中一定要多加注意。今天,上海恒遠生物為大家分享ELISA試劑盒實驗的哪些禁忌,希望可以給您的實驗帶來幫助。

 

實驗禁忌:

    1.加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

    2.作時必須戴手套,穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。

    3.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

    4.同批號試劑組分不得混用。

    5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

    6.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。

    7.要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行確定。

    8.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

    9.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準確。

    10.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

    11.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。

 

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