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細(xì)胞培養(yǎng)直接關(guān)系著實(shí)驗(yàn)的成敗,如果細(xì)胞受到污染將無法提取細(xì)胞培養(yǎng)液,細(xì)胞的污染有哪幾種呢,應(yīng)該如何避免細(xì)胞的污染呢,今天上海恒遠(yuǎn)與您一起分享一下!
細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類,化學(xué)污染和生物污染。 化學(xué)污染 化學(xué)污染是一些對細(xì)胞有毒性的或?qū)?xì)胞產(chǎn)生刺激的化學(xué)物質(zhì)。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學(xué)試劑和細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類,化學(xué)污染和生物污染。
化學(xué)污染
化學(xué)污染是一些對細(xì)胞有毒性的或?qū)?xì)胞產(chǎn)生刺激的化學(xué)物質(zhì)。這些污染一般來自于沒有洗凈的器皿、不純的化學(xué)試劑和質(zhì)量較差的蒸餾水等。
化學(xué)污染中比較引人注意的是細(xì)菌內(nèi)毒素。它是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞死亡后解體釋放出的疏水性的細(xì)胞壁組成物質(zhì),對塑料等疏水性強(qiáng)的物質(zhì)有很強(qiáng)的吸附能力。細(xì)菌內(nèi)毒素可刺激部分細(xì)胞產(chǎn)生一些激素或細(xì)胞因子,對細(xì)胞生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。
細(xì)菌內(nèi)毒素是臨床上的zui主要的熱原(即注射到動(dòng)物體內(nèi)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)熱),所以通過細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的疫苗、細(xì)胞因子等用在臨床上的藥品的生產(chǎn)過程中更是要避免細(xì)菌內(nèi)毒素的污染。
生物污染
生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染,和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在,它們能在合適的環(huán)境中非??焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到,它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化,或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬特異性,所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn),因?yàn)椴《绢w粒特別微小,一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi),對整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的,所以它可能會(huì)使研究人員長期得到
受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1956 年 Robinson 及其同事發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初美國的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn),在該國的細(xì)胞培養(yǎng)中,至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁,在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的,同時(shí)對常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感,不引起 pH 變化,不使培養(yǎng)液渾濁,所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn),但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
細(xì)胞的交叉污染在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)生的嚴(yán)重程度大大超過人們的想象:1981 年對ATCC細(xì)胞株的調(diào)查顯示:超過 60 標(biāo)記為其他細(xì)胞株的細(xì)胞居然是 HeLa 細(xì)胞。
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