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如何避免抗體的冷凍和融化損傷

更新時(shí)間:2015-07-21 點(diǎn)擊量:2284

 花大價(jià)錢買的抗體如果由于由于保存不當(dāng)導(dǎo)致抗體壞掉,未免有點(diǎn)得不償失,如何防止這樣的事情發(fā)生呢,今天就讓上海恒遠(yuǎn)與您一起來分享一下,防止抗體的冷凍和融化損傷的方法。重復(fù)冷凍/融化循環(huán)可使抗體變性,導(dǎo)致其形成使抗體結(jié)合能力降低的聚集物。

 存于 -20℃ 對(duì)于大多數(shù)抗體是適當(dāng)?shù)?;保存?-80℃無明顯優(yōu)勢(shì)。冰箱不能為無霜型。 這些冷凍和融化之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜)恰恰是應(yīng)該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應(yīng)置于具有zui小溫度波動(dòng)的冰箱區(qū)域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上

有些研究人員加入冷凍保護(hù)劑甘油達(dá)到 50% 的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點(diǎn)降低至低于 -20℃。雖然這對(duì)于很多抗體是可接受的,但是只有一小部分我們提供的抗體測(cè)試了在該保存條件下的穩(wěn)定性,并且我們的保證僅適用于按數(shù)據(jù)表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于 -80℃,因?yàn)樵摐囟鹊陀诟视偷哪厅c(diǎn)。請(qǐng)注意甘油可被細(xì)菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護(hù)劑,則應(yīng)當(dāng)小心操作,以得到無菌制備物。應(yīng)避免抗體在稀釋至工作濃度后在 4℃ 下保存超過一天。蛋白質(zhì)在高濃度下保存時(shí)一般不易降解,理想的濃度為1 mg/ml 或高這是在抗體溶液中加入蛋白質(zhì)例如 BSA 作為穩(wěn)定劑的理論基礎(chǔ)。加入的蛋白質(zhì)也有助于減少抗體因結(jié)合于容器壁上而造成的損失。對(duì)于打算進(jìn)行偶聯(lián)的抗體而言,由于穩(wěn)定蛋白質(zhì)會(huì)與抗體競(jìng)爭(zhēng),降低了偶聯(lián)的效率,所以不應(yīng)加入穩(wěn)定蛋白質(zhì)。

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