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人白介素12(IL-12)試劑盒操作步驟

更新時間:2011-08-31 點擊量:1711

人,小鼠,大鼠蛋白是我們供應(yīng)的主要品種。此外,我們還有以下物種的蛋白:牛,馬,貓,豬,犬
 棉鼠,雞,爪蟾,恒河猴,斑馬魚
 果蠅和其他昆蟲
 病毒和細菌

1.         標(biāo)準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

60 ng/L
5號標(biāo)準品
150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
30 ng/L
4號標(biāo)準品
150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
15 ng/L
3號標(biāo)準品
150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
7.5 ng/L
2號標(biāo)準品
150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
3.75 ng/L
1號標(biāo)準品
150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液

  2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人白介素12(IL-12)試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。